赛恩宝生物提供过表达慢病毒、shRNA 慢病毒、过表达 AAV、shAAV 及腺病毒等病毒产品,高滴度、多载体 / 血清型可选、严格质控,覆盖体外感染与体内递送的基因递送全场景。
慢病毒载体(Lentivirus)以 HIV-1 为基础、使用 VSVG 外壳蛋白发展而来的基因治疗工具载体,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,可将外源基因有效整合到宿主染色体上实现持久性表达。可高效感染神经元、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞、原代细胞等多种类型细胞。
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 名称 | 过表达慢病毒 |
| 内容 | 1 mL,>1×10⁸ TU/mL,可根据需要定制 |
| 保存温度 | -80℃ |
| 运输条件 | 干冰运输 |
需求确认 → 方案设计 → 质粒构建与测序验证 → 慢病毒包装与纯化 → 滴度检测与质控 → 交付病毒及报告
已验证载体示例:pLV-CMV-MCS-3×Flag-EF1-mCherry-Puro、pLV-CMV-MCS-3×Flag-EF1-CopGFP-Puro(CMV 强启动子 · 3×Flag 标签 · EF1 荧光报告 · Puro 筛选)。
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 备注 |
|---|---|---|---|
| NOS1060 | 嘌呤霉素 | 1 mL | 慢病毒包装或感染筛选所需,需要时请联系业务员下单 |
| NOS1061 | polybrene | 1 mL | 慢病毒包装或感染筛选所需,需要时请联系业务员下单 |
| HZF10037 | PMD2.G 辅助质粒 | 1 mL | 慢病毒包装或感染筛选所需,需要时请联系业务员下单 |
| HZF10038 | PSPAX2 辅助质粒 | 10 mL | 慢病毒包装或感染筛选所需,需要时请联系业务员下单 |
针对同一靶基因设计并包装 3 条独立靶向不同位点的 shRNA 慢病毒,保证至少 1 条在目标细胞中达到≥70% 的 mRNA 敲低效率;如 3 条均未达标,凭完整实验数据可申请免费补发一次。
| 指标 | 规格 |
|---|---|
| 滴度 | 3×10⁸ TU/mL(可定制),纯化后 ≥1×10⁸ TU/mL |
| 体积 | 200 μL / 条 × 3 条(可定制更大体积) |
| 质控 | qPCR 滴度 + 无菌检测 + 支原体检测 |
| 储存 / 运输 | -80℃ 保存,干冰运输 |
| 交付内容 | 3 管独立 shRNA 慢病毒 + 靶点序列信息 + COA 报告 |
| 问题 | 解答 |
|---|---|
| Q1:什么情况符合“免费补发”条件? | 提交完整的 qPCR 验证数据(含引物序列、扩增曲线、内参对照),证明 3 条 shRNA 在目标细胞中的敲低效率均低于 70%,即可申请补发。 |
| Q2:是否保证蛋白水平的敲低? | mRNA 敲低是蛋白敲低的前提,但蛋白水平的实际效果受抗体质量、蛋白半衰期等因素影响。我们建议客户在确认 mRNA 敲低后,自行进行 Western Blot 验证蛋白水平。 |
| Q3:3 条 shRNA 是混合发货还是单独发货? | 3 条 shRNA 慢病毒为独立包装、单独发货,便于客户分别测试各靶点的敲低效果。 |
腺相关病毒(AAV)是无包膜单链 DNA 病毒,因宿主范围广、安全性高、免疫原性低、长期稳定表达被公认为体内基因研究最具前景的病毒载体之一。与慢病毒不同,AAV 不整合宿主基因组,避免插入突变风险,以游离形式长期稳定表达外源基因,在部分组织中表达可持续数年。
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 名称 | 过表达 AAV |
| 规格 | 1×10¹³ vg/mL,1 mL |
| 保存温度 | -80℃ |
| 运输条件 | 干冰运输 |
| 问题 | 解答 |
|---|---|
| Q1:AAV 和慢病毒有什么区别?如何选择? | AAV 不整合到宿主基因组,以游离形式存在,表达持久、安全性高,更适合体内实验和长期表达研究;慢病毒可整合到基因组,适合体外稳转细胞系构建。建议根据实验目的选择。 |
| Q2:如何选择合适的 AAV 血清型? | 根据目标组织或细胞类型选择:肝脏研究推荐 AAV8 或 AAV9;神经系统研究推荐 AAV9(可穿越血脑屏障)或 AAV2;肌肉研究推荐 AAV1、AAV6 或 AAV8。我们可提供血清型筛选服务。 |
| Q3:AAV 的包装容量有限制吗? | AAV 基因组包装容量约为 4.7 kb(含两端 ITR)。目的基因(含启动子、标签等调控元件)总长度建议控制在 2.5 kb 以内;如目的基因较大,可咨询我们评估双 AAV 方案。 |
| Q4:体内实验需要多少 AAV 病毒量? | 体内实验通常需要 10¹¹–10¹³ vg/只(根据给药方式和靶组织不同有所差异),具体用量可参考相关文献或咨询我们的技术支持。 |
| Q5:是否提供荧光对照病毒? | 是的,每批 AAV 病毒均免费附带荧光标记对照病毒(如 EGFP 或 mCherry),滴度 ≥ 1×10¹³ vg/mL,方便客户评估感染效率。 |
shAAV"三保一"基因敲低服务:针对同一靶基因设计 3 条独立靶向不同位点的 shRNA,包装为高滴度 AAV(1×10¹³ vg/mL),保证至少 1 条在目标细胞中达到 ≥70% 的 mRNA 敲低效率,无效免费重做。
| 形式 | 特点 | 适用场景 |
|---|---|---|
| 独立包装型 | 3 条 shRNA 分别包装为 3 管独立 AAV,每管 1×10¹³ vg/mL、1 mL(100 μL×10 支分装),附带荧光对照病毒 | 需分别评估各 shRNA 敲低效率、系统性筛选 |
| 三合一混合型 | 3 条 shRNA 混合包装于同一管,多靶点协同补偿,一次感染三重保障 | 追求高效便捷、体内动物实验一步到位 |
| 问题 | 解答 |
|---|---|
| Q1:两种形式如何选择? | 形式一(独立包装):适合需要分别评估各 shRNA 效率、进行系统性筛选,或希望保留多个候选序列备用的客户;形式二(3 in 1 混合):适合追求高效便捷、直接开展正式实验的客户,尤其适合体内动物实验——无需预先体外筛选,一步到位。 |
| Q2:“三保一”的保障条款是什么? | 在目标细胞转染效率 ≥85%–90% 的前提下,3 条 shRNA 中保证至少 1 条在 mRNA 水平的敲低效率 ≥70%。如全部未达标,凭完整 qPCR 验证数据可申请免费重做一次(靶基因本底表达量极低时可能不保证抑制效果)。 |
腺病毒(Adenovirus,Ad)为无包膜双链 DNA 病毒,感染谱广,可高效转导分裂与非分裂细胞。重组腺病毒载体不整合宿主基因组,以附加体形式瞬时高表达外源基因,表达峰值高,是体外高表达与体内免疫、基因治疗瞬时表达研究的常用工具。
如何选择合适的病毒载体?以下对比帮助您快速决策:
| 载体 | 基因组 | 整合性 | 表达时长 | 滴度 | 适用场景 |
|---|---|---|---|---|---|
| 慢病毒 | 单链 RNA | 整合(持久) | 长期稳定 | >1×10⁸ TU/mL | 稳转株、难转细胞、体外长期实验 |
| 腺病毒 | 双链 DNA | 不整合(附加体) | 瞬时高表达(数周) | 1×10¹⁰ PFU/mL 级 | 瞬时高表达、免疫 / 疫苗研究 |
| AAV | 单链 DNA | 不整合(游离体) | 体内可持续数年 | 1×10¹³ vg/mL | 体内研究、组织定向、长期表达 |