赛恩宝生物提供质粒产品与载体构建一站式服务,涵盖病毒质粒、基因过表达质粒、shRNA 干扰质粒、sgRNA/CRISPR 编辑质粒及各类工具质粒。质粒是通过基因重组 DNA 技术将目的序列构建到载体上的基因功能研究核心工具,经转染导入细胞后可实现基因过表达、干扰沉默与基因编辑等实验目的。
病毒质粒是包装慢病毒等病毒颗粒的核心质粒系统,由包装质粒、包膜质粒与转移载体共同组成。搭配目的基因转移载体即可包装出高滴度、低本底的病毒颗粒,用于稳定细胞株构建、难转染细胞递送与体内实验。
| 质粒 | 说明 |
|---|---|
| psPAX2 | 慢病毒核心包装质粒,表达 Gag、Pol、Rev,负责病毒结构蛋白与复制元件 |
| pMD2.G | 包膜质粒,表达 VSV-G 包膜蛋白,宿主谱广、感染几乎所有哺乳动物细胞 |
| pLP1 / pLP2 / pLP3 | 四质粒慢病毒包装系统辅助质粒,用于更安全的病毒包装 |
| pCDH 系列 | 慢病毒过表达转移载体,自带荧光 + 双启动子 |
| pLVX-EF1α | 慢病毒稳定过表达骨架,EF1α 启动子、表达沉默低 |
| Lenti-Cre / Lenti-LoxP | 慢病毒条件性重组载体,用于构建稳转条件性细胞株 |
质粒是基因功能研究中常用的一种工具,通过基因重组 DNA 技术将目的序列构建到载体上。应用比较广泛的质粒主要有过表达质粒和 shRNA 质粒,通过转染实验带入细胞,实现不同的实验目的。
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 名称 | 基因过表达质粒 |
| 规格 | 100 μg 质粒 + 500 μL 菌液 |
| 保存温度 | -20℃ |
| 运输条件 | 常温运输 |
| 类型 | 常用质粒 |
|---|---|
| 真核过表达 | pcDNA3.1、pCAG、EF1α 系列 |
| 慢病毒载体 | pCDH、pLVX、pLKO.1 |
| 荧光融合 | pEGFP、mCherry 融合载体 |
| 原核表达 | pET28a、pGEX |
| 基因编辑 | CRISPR/Cas9 gRNA 载体 |
shRNA 质粒是将一段干扰片段克隆到特定载体上,并通过带有荧光标记便于观察,以实现降低基因表达的目的。shRNA 质粒操作方便、质量稳定,可带筛选标记,荧光便于检测转染效率,可以构建稳定表达的细胞系,在基础研究中占有重要地位。
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 名称 | shRNA 质粒三保一套装 |
| 规格 | 3 个靶点/基因,100 μg/靶点,500 μL 甘油菌 |
| 保存温度 | -20℃ |
| 运输条件 | 常温运输 |
| 产品类型 | 产品组分及要求 |
|---|---|
| 单条 shRNA | 单条 shRNA |
| shRNA 三保一 | 三条目的基因 shRNA + 空载对照 |
| shRNA 三保一升级版 | 三条目的基因 shRNA + 空载对照 + 转染试剂 |
| shRNA 四保一 | 四条目的基因 shRNA + 空载对照 |
| 基因过表达质粒 | 根据不同实验目的进行改造 |
| 质粒抽提 | 去内毒素 |
| 骨架 | 荧光 | 抗性 |
|---|---|---|
| pLKO.1-PURO | 无荧光 | PURO 抗性 |
| pLKO.1-NEO | 无荧光 | NEO 抗性 |
| pLKO.1-Hygro | 无荧光 | Hygro 抗性 |
| pLKO.1-copGFP-PURO | 绿色荧光 | PURO 抗性 |
| pLKO.1-mCherry-PURO | 红色荧光 | PURO 抗性 |
| tet-pLKO-PURO | Tet 诱导 | PURO 抗性 |
| pLKO.1-CMV-copGFP-PURO | 绿色荧光 | PURO 抗性 |
提供目标基因名称,赛恩宝技术团队将针对特定基因设计干扰靶点并克隆到载体。
面向 CRISPR/Cas9 基因编辑实验的 sgRNA 质粒与配套工具,覆盖一体化敲除、慢病毒 gRNA 骨架、双切口精准编辑与转录激活/沉默;配合我司 sgRNA 验证引物设计合成服务,可快速完成 sgRNA 效率验证与基因敲除/敲入筛选。
| 质粒 | 说明 |
|---|---|
| PX459 / PX458 / PX461(SpCas9+gRNA) | 一体化敲除质粒,带嘌呤霉素/荧光标记 |
| LentiGuide-Puro | 慢病毒 gRNA 空载骨架,只需插入靶点序列,用于稳转细胞敲除 |
| Cas9n | 双切口质粒,降低脱靶,适合精准基因编辑 |
| SAM 激活质粒 / KRAB 抑制质粒 | 基因转录激活/沉默工具质粒 |
| Tet-On-Cas9 / Tet-On-gRNA | 诱导型 CRISPR 质粒,加 Dox 才激活基因敲除,时空可控 |
| 光控 CRISPR 激活/抑制质粒 | 光遗传学条件质粒,光照时空精准调控 |
赛恩宝常备工具质粒库覆盖 8 大类别 23 种常用质粒,另备诱导表达与条件性表达系统质粒 29 种,即取即用、省去繁琐构建,助力快速开展基因功能研究。
| 类别 | 质粒 | 说明 |
|---|---|---|
| 慢病毒包装专用 | psPAX2 | 慢病毒核心包装质粒,表达 Gag、Pol、Rev |
| 慢病毒包装专用 | pMD2.G | 包膜质粒,表达 VSV-G 包膜蛋白,宿主谱广 |
| 慢病毒包装专用 | pLP1/pLP2/pLP3 | 四质粒慢病毒包装系统辅助质粒,更安全 |
| CRISPR 基因编辑 | PX459/PX458/PX461(SpCas9+gRNA) | 一体化敲除质粒,带嘌呤霉素/荧光标记 |
| CRISPR 基因编辑 | LentiGuide-Puro | 慢病毒 gRNA 空载骨架,用于稳转细胞敲除 |
| CRISPR 基因编辑 | Cas9n | 双切口质粒,降低脱靶 |
| CRISPR 基因编辑 | SAM 激活质粒、KRAB 抑制质粒 | 基因转录激活/沉默工具质粒 |
| shRNA 干扰 | pLKO.1-Puro | 经典慢病毒 shRNA 空载,最常用基因敲低骨架 |
| shRNA 干扰 | pLKO.1-EGFP/Neo/Hygro | 带荧光/不同抗性筛选的 shRNA 工具质粒 |
| shRNA 干扰 | pLVX-shRNA | 四环素可诱导 shRNA 干扰质粒 |
| 真核过表达空骨架 | pcDNA3.1(+/–) | 哺乳细胞通用过表达空载,CMV 强启动子 |
| 真核过表达空骨架 | pCAGGS | CAG 超强启动子,适合难表达蛋白、原代细胞 |
| 真核过表达空骨架 | pCDH 系列 | 慢病毒过表达空载,自带荧光 + 双启动子 |
| 真核过表达空骨架 | pLVX-EF1α | 慢病毒稳定过表达骨架,EF1α 启动子沉默低 |
| 荧光 & 标签 | pEGFP-C1/N1、pmCherry-C1/N1 | 红绿荧光空载,蛋白定位、融合表达 |
| 荧光 & 标签 | Flag/HA/Myc/His 标签空载 | pcDNA3.1-Flag/HA 等,插入基因即带标签 |
| 荧光 & 标签 | GST/MBP 标签质粒 | 用于原核蛋白纯化、互作实验 |
| 双荧光素酶报告 | pGL3-Basic | 启动子/转录因子结合位点验证空载 |
| 双荧光素酶报告 | pGL3-Control | 阳性对照报告质粒 |
| 双荧光素酶报告 | Renilla 海肾荧光质粒 | 内参对照,用于双荧光素酶实验 |
| 原核表达 | pET28a(+) | His 标签原核蛋白表达标配 |
| 原核表达 | pGEX-4T-1 | GST 标签,用于蛋白纯化、Pull-down |
| 原核表达 | pMAL-c5X | MBP 标签,提高蛋白可溶性 |
| 系统 | 代表质粒 | 说明 |
|---|---|---|
| 四环素 Tet 诱导(最主流) | pLVX-Tet-On Advanced、pLVX-TRE3G、Lenti-Tet-On-Puro/Hygro | 加强力霉素 Dox 才表达(Tet-On 最常用),药物可控开/关基因;Tet-Off 反向关闭 |
| 四环素诱导 shRNA | pLKO-Tet-On shRNA、pLVX-shRNA-Tet | 加 Dox 才启动干扰,避免持续敲低导致细胞致死 |
| 诱导型 CRISPR | Tet-On-Cas9、Tet-On-gRNA | 加 Dox 才激活基因敲除,时空可控 |
| Cre / LoxP 条件性 | pCMV-Cre、pCAG-Cre、Lenti-Cre-Puro、ER-Cre(他莫昔芬诱导)、pLoxP-Stop-Flox | Cre 切割后开启基因表达,条件性敲除/过表达、动物特异性编辑 |
| 激素 / 化学诱导 | ER-LBD 融合质粒、pVgRXR/pIND、FRB/FKBP 系统 | 4-OHT / 蜕皮激素类似物 / 雷帕霉素诱导,本底极低 |
| 光诱导(光遗传学) | 蓝光诱导转录激活质粒、光控 CRISPR 激活/抑制质粒 | 无化学药物,光照时空精准调控 |
| 组织特异性启动子 | Synapsin(神经)、ALB(肝)、Myh6(心肌)、VE-Cadherin(内皮) | 只在特定细胞/组织表达,天然条件性 |
质粒转染是实验成功的关键环节,推荐搭配我司配套转染试剂使用:
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 备注 |
|---|---|---|---|
| S19110-200 | Synbio® HE Transfection Reagent | 200 μL | 对多种常见细胞、难转细胞、原代细胞均具有高水平转染效率,高效低毒、操作简单、重复性好 |
| S19110-500 | Synbio® HE Transfection Reagent | 0.5 mL | 同上 |
| S19110-1000 | Synbio® HE Transfection Reagent | 1 mL | 同上 |
| P09310-10 | SynBio® NEO-PEI Transfection Reagent | 10 mL | 即用型无需现配,低毒稳定、递送性能更优,广谱适配 HEK-293/293T、CHO-K1、COS-1/7、NIH/3T3、Sf9、HepG2、HeLa 等 |
| P09310-100 | SynBio® NEO-PEI Transfection Reagent | 500 mL | 同上 |
| P09310-1000 | SynBio® NEO-PEI Transfection Reagent | 1000 mL | 同上 |
| P09310-10000 | SynBio® NEO-PEI Transfection Reagent | 10000 mL | 同上 |